商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | U2OS人骨肉瘤細(xì)胞 | 鑒定 | STR鑒定正確 |
貨號 | E-XB6254 | 種屬 | 人 |
生長特性 | 貼壁細(xì)胞 | 細(xì)胞形態(tài) | 上皮細(xì)胞樣 |
商品詳情：
生長特性 貼壁細(xì)胞
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
凍存條件
凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度：液氮
培養(yǎng)方案A（默認(rèn)）
生長培養(yǎng)基:
McCoy's 5A＋10% FBS＋1% P/S
培養(yǎng)條件:
氣相：空氣，95%；CO2，5%, 溫度：37℃
推薦傳代比例 1:3-1:4
推薦換液頻率 2-3次/周
參考資料(來源文獻(xiàn))
背景描述 U-2 OS細(xì)胞(原名2T)是由Ponten·J和Saksela·E在1964年從一名15歲女孩的脛骨中等分化的肉瘤中分離建立的。U-2 OS細(xì)胞與WI-38細(xì)胞共培養(yǎng)或用抗猴空泡病毒SV40、呼吸道合胞病毒RSV或腺病毒的補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)(CF法)未檢測到病毒。U-2 OS細(xì)胞表達(dá)胰島素樣生長因子I、II(IGF-I、IGF-II)受體和骨肉瘤衍生生長因子(ODGF)。
年齡（性別） 女性；15歲
組織來源 骨；骨肉瘤
細(xì)胞類型 腫瘤細(xì)胞
腫瘤類型 肉瘤細(xì)胞
生物安全等級 BSL-1
倍增時(shí)間 ~25-30 hours
受體表達(dá)情況 insulin-like growth factor I (IGF-I);insulin-like growth factor II (IGF II)
抗原表達(dá)情況 Blood Type A; Rh+; HLA A2, Aw30, B12, Bw35, B40(+/-)
基因表達(dá)情況 osteosacoma derived growth factor (ODGF), Blood Type A; Rh+; HLA A2, Aw30, B12, Bw35, B40(+/-)
保藏機(jī)構(gòu) ATCC; HTB-96 DSMZ; ACC-785 ECACC; 92022711
細(xì)胞系培養(yǎng)步驟：
細(xì)胞系培養(yǎng)?的步驟主要包括細(xì)胞復(fù)蘇、細(xì)胞傳代和細(xì)胞凍存。
細(xì)胞復(fù)蘇?：
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。
將融化的細(xì)胞移入離心管中，加入37℃預(yù)熱的DMEM培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細(xì)胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
細(xì)胞傳代?：
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí)，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DME培養(yǎng)基終止消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù)，然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
?細(xì)胞凍存?：
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí)，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入DMEM培養(yǎng)基終止消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
這些步驟確保了細(xì)胞的生長和繁殖能夠在體外環(huán)境中得到有效的維持和擴(kuò)展，為科學(xué)研究提供了大量的細(xì)胞樣本?。
?細(xì)胞系培養(yǎng)?的步驟主要包括細(xì)胞復(fù)蘇、細(xì)胞傳代和細(xì)胞凍存。
細(xì)胞復(fù)蘇?：
將凍存細(xì)胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。
將融化的細(xì)胞移入離心管中，加入37℃預(yù)熱的DMEM培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細(xì)胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
細(xì)胞傳代?：
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí)，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DMEM培養(yǎng)基終止消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進(jìn)行計(jì)數(shù)，然后按照所需細(xì)胞量在含5% CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
細(xì)胞凍存?：
當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí)，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入進(jìn)行消化，放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入DMEM培養(yǎng)基終止消化，轉(zhuǎn)移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
這些步驟確保了細(xì)胞的生長和繁殖能夠在體外環(huán)境中得到有效的維持和擴(kuò)展，為科學(xué)研究提供了大量的細(xì)胞樣本?
細(xì)胞接收后的處理：
1）U2OS人骨肉瘤細(xì)胞收到細(xì)胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請拍照后及時(shí)聯(lián)系我們。
2）請?jiān)?或5X顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞狀態(tài)，同時(shí)給剛收到的細(xì)胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時(shí)收到時(shí)細(xì)胞狀態(tài)的依據(jù)
3）貼壁細(xì)胞：細(xì)胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細(xì)胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細(xì)胞在快遞運(yùn)送過程中會(huì)因振動(dòng)脫落和脫落后成團(tuán)的情況。若鏡下觀察細(xì)胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細(xì)胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細(xì)胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細(xì)胞生長密度達(dá)70%-80%以上，可以對細(xì)胞進(jìn)行傳代處理。傳代過程中，若因運(yùn)輸振動(dòng)脫落的細(xì)胞需要離心回收。
4）備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。 收到細(xì)胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1） 準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠卵泡膜細(xì)胞 | PATU8988t（PATU8988）人胰腺癌細(xì)胞 |
小鼠胰腺星狀細(xì)胞 | SBC-2人小細(xì)胞肺癌 |
小鼠胸腺成纖維細(xì)胞 | SK-N-BE(2)人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 |
小鼠睪丸支持細(xì)胞 | SW1990人胰腺癌細(xì)胞 |
小鼠胰島細(xì)胞 | TOV-112D人上皮性卵巢癌細(xì)胞 |
小鼠垂體細(xì)胞 | XWLC-05云南宣威人肺腺癌細(xì)胞系 |
小鼠胸腺上皮細(xì)胞 | 707.fl白血病 |
小鼠輸卵管平滑肌細(xì)胞 | M-NFS-60白血病 |
小鼠子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞 | Tb1Lu蝙蝠肺細(xì)胞 |
小鼠腎上腺皮質(zhì)細(xì)胞 | LLC-WRC256大鼠腹水癌細(xì)胞 |
小鼠腎上腺髓質(zhì)細(xì)胞 | ND7/23大鼠神經(jīng)母細(xì)胞 |
小鼠胰腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞 | HuNS1多發(fā)性骨髓瘤 |
小鼠胰腺腺泡上皮細(xì)胞 | ABC-1非小細(xì)胞肺癌 |
小鼠甲狀旁腺細(xì)胞 | HCC-2108非小細(xì)胞肺癌 |
小鼠腮腺細(xì)胞 | LU65A非小細(xì)胞肺癌 |
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