商品屬性：
產品名稱 | SK-MEL-5人皮膚惡性黑色素瘤細胞 | 鑒定 | STR鑒定正確 |
貨號 | E-XB6329 | 種屬 | 人 |
生長特性 | 貼壁生長 | 細胞形態(tài) | 上皮細胞樣， |
商品詳情：
SK-MEL-5是從皮膚組織中分離的黑色素瘤細胞系，所述皮膚組織得自24歲的白人女性惡性黑色素瘤患者。該細胞系是一種合適的轉染宿主，也可作為在患有黑素瘤的患者中檢測黑素瘤特異性抗體的靶細胞來源。這是T. Takahashi及其同事分離出的一系列非常廣泛的黑色素瘤細胞系之一。在裸鼠中；形成惡性黑色素瘤。
1） 來源：24歲 白人 女性惡性黑色素瘤
2） 形態(tài)：上皮細胞樣，貼壁生長
3） 含量：>1x106 細胞數(shù)
4） 規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝
5) 用途：僅供科研使用。
細胞系培養(yǎng)步驟：
細胞系培養(yǎng)?的步驟主要包括細胞復蘇、細胞傳代和細胞凍存。
細胞復蘇?：
將凍存細胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內不斷搖動促進其融化。
將融化的細胞移入離心管中，加入37℃預熱的DMEM培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
細胞傳代?：
當細胞密度達到80%~90%時，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入進行消化，放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DME培養(yǎng)基終止消化，轉移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進行計數(shù)，然后按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
?細胞凍存?：
當細胞密度達到80%~90%時，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入行消化，放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入DMEM培養(yǎng)基終止消化，轉移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
這些步驟確保了細胞的生長和繁殖能夠在體外環(huán)境中得到有效的維持和擴展，為科學研究提供了大量的細胞樣本?。
?細胞系培養(yǎng)?的步驟主要包括細胞復蘇、細胞傳代和細胞凍存。
細胞復蘇?：
將凍存細胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內不斷搖動促進其融化。
將融化的細胞移入離心管中，加入37℃預熱的DMEM培養(yǎng)基中（其中胎牛血清約為10%），輕輕吹勻，離心，500g離心2min，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，制成細胞懸液，接種于培養(yǎng)皿/瓶中，在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
細胞傳代?：
當細胞密度達到80%~90%時，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入進行消化，放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入適量DMEM培養(yǎng)基終止消化，轉移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。加入DMEM培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻，吸取10微升進行計數(shù)，然后按照所需細胞量在含5% CO2的細胞培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)。
細胞凍存?：
當細胞密度達到80%~90%時，去掉培養(yǎng)基，用1X PBS清洗2次。
加入進行消化，放入細胞培養(yǎng)箱中約2-3min。
加入DMEM培養(yǎng)基終止消化，轉移至離心管后500g離心2min，棄上清液，再加入DMEM培養(yǎng)基清洗，棄上清液。
這些步驟確保了細胞的生長和繁殖能夠在體外環(huán)境中得到有效的維持和擴展，為科學研究提供了大量的細胞樣本
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細胞接收后的處理：
1）SK-MEL-5人皮膚惡性黑色素瘤細胞收到細胞后，75%酒精瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染，請拍照后及時聯(lián)系我們。
2）請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時給剛收到的細胞拍照（10×，20×）各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)
3）貼壁細胞：細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h，顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況，有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下，可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基（若有未貼壁的細胞需要離心回收，重懸打入到原培養(yǎng)瓶中）,加入新配制的培養(yǎng)基6-8mL，放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上，可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中，若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。
4）備注：運輸用的培養(yǎng)基（灌液培養(yǎng)基）不能再用來培養(yǎng)細胞，請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。 收到細胞后次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1：2傳代 。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1） 準備MEM培養(yǎng)基；胎牛血清，10%；雙抗，1%。
2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。
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