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產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），專用于定量檢測(cè)小鼠血清、血漿、組織勻漿及細(xì)胞上清液中的成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子 4（FGF4）蛋白濃度。檢測(cè)范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL，靈敏度達(dá) 0.16 ng/mL，適用于胚胎發(fā)育、細(xì)胞增殖、腫瘤發(fā)生及組織再生研究等領(lǐng)域。

產(chǎn)品名稱：小鼠成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子4(FGF4)elisa試劑盒

英文名稱：FGF4 ELISA Kit

產(chǎn)品規(guī)格：48T/96T

產(chǎn)品貨號(hào)：CS-1188E

檢測(cè)原理：

小鼠成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子 4 (FGF4) elisa 試劑盒的原理是雙抗體夾心法，通過固相載體捕獲抗原，再用酶標(biāo)記的檢測(cè)抗體進(jìn)行識(shí)別，最后通過底物顯色反應(yīng)來定量檢測(cè)。

固相化：微孔板預(yù)先包被抗小鼠 FGF4 抗體。

結(jié)合：加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本，FGF4 被固相抗體捕獲。

檢測(cè)：加入生物su化的抗小鼠 FGF4 抗體和 HRP 標(biāo)記的親和素，形成 "抗體 - 抗原 - 酶標(biāo)抗體" 復(fù)合物。

顯色：加入 TMB 底物，被 HRP 催化后由藍(lán)色變?yōu)辄S色。

測(cè)定：用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)測(cè)定吸光度 (OD 值)，濃度與 OD 值成正比。

實(shí)驗(yàn)步驟?：

1.平衡試劑：試劑盒室溫平衡 30 min，濃縮洗滌液按比例稀釋備用。

2.加樣：設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)品孔、樣品孔，每孔加對(duì)應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)品 / 稀釋后樣本，封板溫育。

3.溫育反應(yīng)：37℃孵育 30–60 min，完成抗原抗體結(jié)合。

4.洗板：棄液甩干，洗滌液注滿每孔，浸泡后拍干，重復(fù)洗板3–5 次。

5.加酶結(jié)合物：除空白孔外，每孔加入 HRP 標(biāo)記抗體，封板 37℃再次溫育。

6.再次洗板：同上述洗板流程，洗凈未結(jié)合游離酶標(biāo)物。

7.顯色：每孔先后加入 A、B 顯色液，避光 37℃顯色 10–15 min。

公司正在出售的產(chǎn)品：

操作步驟?：

?1、試劑與樣本準(zhǔn)備?：

將試劑盒平衡至室溫（20-25℃），按說明書稀釋洗滌緩沖液（通常1:19）。

?標(biāo)準(zhǔn)品?：用梯度稀釋至0.313、0.625、1.25、2.5、5、10、20 ng/mL系列濃度。

?樣本?：血清、血漿或組織勻漿上清。若t-PA濃度高，可按說明書（如1:10）稀釋。

?2、加樣與孵育?：

每孔加入100μL標(biāo)準(zhǔn)品或樣本。

輕輕振蕩混勻，避免觸碰孔壁。

37℃孵育90分鐘（部分試劑盒可能為120分鐘，需以說明書為準(zhǔn)）。

?3、洗滌?：

棄去孔內(nèi)液體，用洗滌緩沖液加滿每孔，靜置30秒后甩干，重復(fù)5-6次。

4?、加檢測(cè)抗體與孵育?：

每孔加入100μL化抗豬t-PA檢測(cè)抗體。

37℃孵育60分鐘。

5?、再次洗滌?：

同步驟3，洗去未結(jié)合抗體。

6?、顯色?：

每孔加入90-100μL TMB底物混合液（A液+B液）。

37℃避光孵育10-15分鐘。

?7、終止與測(cè)定?：

每孔加入50μL終止液，立即混勻（顏色由藍(lán)變黃）。

在加終止液后15分鐘內(nèi)，用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔吸光度（OD值）。