產(chǎn)品簡介:

本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA),專用于定量檢測小鼠血清、血漿、組織勻漿及細(xì)胞上清液中的成纖維細(xì)胞生長因子 9(FGF9)蛋白濃度。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL,靈敏度達(dá) 0.16 ng/mL,適用于細(xì)胞增殖分化、組織修復(fù)、軟骨發(fā)育及腫瘤研究等領(lǐng)域。
產(chǎn)品名稱:小鼠成纖維細(xì)胞生長因子9(FGF9)elisa試劑盒
英文名稱:FGF9 ELISA Kit
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
產(chǎn)品貨號:CS-1185E
檢測原理:

小鼠成纖維細(xì)胞生長因子 9 (FGF9) elisa 試劑盒的原理是雙抗體夾心法,通過固相載體捕獲抗原,再用酶標(biāo)記的檢測抗體進(jìn)行識別,最后通過底物顯色反應(yīng)來定量檢測。
固相化:微孔板預(yù)先包被抗小鼠 FGF9 抗體。
結(jié)合:加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本,FGF9 被固相抗體捕獲。
檢測:加入生物su化的抗小鼠 FGF9 抗體和 HRP 標(biāo)記的親和素,形成 "抗體 - 抗原 - 酶標(biāo)抗體" 復(fù)合物。
顯色:加入 TMB 底物,被 HRP 催化后由藍(lán)色變?yōu)辄S色。
測定:用酶標(biāo)儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值),濃度與 OD 值成正比。
實(shí)驗(yàn)步驟?:

?試劑準(zhǔn)備?:將試劑盒平衡至室溫(20-25℃),洗滌緩沖液按1:19稀釋。標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋至所需濃度。
?加樣?:每孔加入100μL標(biāo)準(zhǔn)品或樣本,37℃孵育90分鐘。
?洗滌?:棄去液體,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后甩干,重復(fù)5次。
?加檢測抗體?:每孔加入100μL檢測抗體-HRP,37℃孵育60分鐘。
?洗滌?:同步驟3。
?顯色?:每孔加入90μL TMB底物A+B混合液,37℃避光孵育15分鐘。
?終止?:每孔加入50μL終止液,立即搖勻(顏色由藍(lán)變黃)。
?檢測?:450nm波長測定吸光度(OD值),15分鐘內(nèi)完成。
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操作步驟?:

1.試劑準(zhǔn)備
將試劑盒平衡至室溫(20-25℃),濃縮洗滌液按 1:20 稀釋備用。
標(biāo)準(zhǔn)品按說明書進(jìn)行梯度稀釋,配制系列濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液。
2.實(shí)驗(yàn)流程
加樣:設(shè)置空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔,空白孔僅加稀釋液,其余孔分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品,37℃孵育。
加酶標(biāo)抗體:除空白孔外,每孔加入酶標(biāo)抗體,輕輕混勻,37℃避光孵育。
洗滌:棄去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后甩干,重復(fù)洗滌 4-5 次,最后拍干殘留液體。
顯色:每孔加入 TMB 顯色液,37℃避光孵育,孔內(nèi)呈現(xiàn)藍(lán)色。
終止:每孔加入終止