產品簡介:

本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法(ELISA),專用于定量檢測小鼠組織勻漿、細胞核提取物中的 DNA 甲基轉移酶 1(DNMT1)蛋白濃度。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL,靈敏度達 0.16 ng/mL,適用于表觀遺傳、DNA 甲基化、基因沉默及腫瘤發生研究等領域。
產品名稱:小鼠DNA(DNMT1)elisa試劑盒
英文名稱:DNMT1 ELISA Kit
產品規格:48T/96T
產品貨號:CS-1365E
檢測原理:

小鼠 DNA 甲基轉移酶 1 (DNMT1) elisa 試劑盒的原理是雙抗體夾心法,通過固相載體捕獲抗原,再用酶標記的檢測抗體進行識別,最后通過底物顯色反應來定量檢測。
固相化:微孔板預先包被抗小鼠 DNMT1 抗體。
結合:加入標準品或樣本,DNMT1 被固相抗體捕獲。
檢測:加入生物su化的抗小鼠 DNMT1 抗體和 HRP 標記的親和素,形成 "抗體 - 抗原 - 酶標抗體" 復合物。
顯色:加入 TMB 底物,被 HRP 催化后由藍色變為黃色。
測定:用酶標儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值),濃度與 OD 值成正比。
實驗步驟?:

?試劑準備?:將試劑盒平衡至室溫(20-25℃),洗滌緩沖液按1:19稀釋。標準品梯度稀釋至所需濃度。
?加樣?:每孔加入100μL標準品或樣本,37℃孵育90分鐘。
?洗滌?:棄去液體,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后甩干,重復5次。
?加檢測抗體?:每孔加入100μL檢測抗體-HRP,37℃孵育60分鐘。
?洗滌?:同步驟3。
?顯色?:每孔加入90μL TMB底物A+B混合液,37℃避光孵育15分鐘。
?終止?:每孔加入50μL終止液,立即搖勻(顏色由藍變黃)。
?檢測?:450nm波長測定吸光度(OD值),15分鐘內完成。
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操作步驟?:

1.試劑提前室溫平衡 30 min,濃縮洗滌液按說明書稀釋配制。
2.設置空白孔、標準品孔、待測樣品孔,精準加樣后封板。
3.37℃恒溫孵育結合反應,結束后棄孔內液體拍干。
4.加滿洗滌液浸泡清洗,重復洗板 3–5 次,去除未結合雜質。
5.除空白孔外,每孔加入 HRP 酶結合物,再次 37℃溫育。
6.重復洗板流程洗凈游離酶標抗體,保證背景干凈。
7.依次加入顯色液避光顯色,待梯度藍色清晰顯現。
8.加入終止液終止反應,顏色由藍轉黃,即刻用酶標儀讀取 OD 值。
9.根據標準曲線擬合計算,得出樣本目標物質濃度。