產品簡介:

本試劑盒采用競爭法酶聯免疫吸附法(ELISA),專用于定量檢測小鼠組織勻漿、細胞提取物中的 1,4,5 - 三磷酸肌醇(IP3)含量。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL,靈敏度達 0.16 ng/mL,適用于細胞信號轉導、鈣信號調控、磷脂代謝及受體通路研究等領域。
產品名稱:小鼠1,4,5-三磷酸肌醇(IP3)elisa試劑盒
英文名稱:IP3 ELISA Kit
產品規格:48T/96T
產品貨號:CS-1434E
檢測原理:

小鼠 1,4,5 - 三磷酸肌醇 (IP3) elisa 試劑盒的原理是競爭法,通過固相載體包被抗原與樣本抗原競爭結合抗體,再用酶標抗體識別,最后通過底物顯色反應來定量檢測。
固相化:微孔板預先包被 IP3 人工抗原。
結合:加入標準品或樣本,樣本 IP3 與固相 IP3 競爭結合抗體。
檢測:加入酶標特異性抗體,形成抗原抗體復合物。
顯色:加入 TMB 底物,被 HRP 催化后由藍色變為黃色。
測定:用酶標儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值),濃度與 OD 值成反比。
實驗步驟?:

?試劑準備?:將試劑盒平衡至室溫(20-25℃),洗滌緩沖液按1:19稀釋。標準品梯度稀釋至所需濃度。
?加樣?:每孔加入100μL標準品或樣本,37℃孵育90分鐘。
?洗滌?:棄去液體,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后甩干,重復5次。
?加檢測抗體?:每孔加入100μL檢測抗體-HRP,37℃孵育60分鐘。
?洗滌?:同步驟3。
?顯色?:每孔加入90μL TMB底物A+B混合液,37℃避光孵育15分鐘。
?終止?:每孔加入50μL終止液,立即搖勻(顏色由藍變黃)。
?檢測?:450nm波長測定吸光度(OD值),15分鐘內完成。
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操作步驟?:

1. 試劑回溫至 20–25℃,稀釋洗滌液、梯度配制標準品。
2. 每孔加 100μL 標準 / 樣本,37℃孵育 90min,洗板 5 次。
3. 加 HRP 抗體,37℃孵育 60min,再次洗板 5 次。
4. 加 TMB 避光顯色 15min,加終止液混勻。
5. 450nm 快速測 OD 值,擬合曲線算濃度。