本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA),專用于定量檢測小鼠血清、血漿、組織勻漿及細(xì)胞上清液中的磷脂酶A2(PL-A2)蛋白濃度。檢測范圍覆蓋0.313-20 ng/mL,靈敏度達(dá)0.16 ng/mL,適用于炎癥反應(yīng)、脂質(zhì)代謝及心血管疾病相關(guān)研究等領(lǐng)域。
產(chǎn)品名稱 |
小鼠磷脂酶A2(PL-A2)elisa試劑盒 | 英文名稱 | PL-A2 ELISA Kit |
貨號(hào) | CS-0898E | 規(guī)格 | 48T/96T |
保存 | 避光保存 | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
核心原理:

?固相化?:微孔板預(yù)先包被抗小鼠PL-A2抗體。
?結(jié)合?:加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本,PL-A2被固相抗體捕獲。
?檢測?:加入化的抗小鼠PL-A2抗體和HRP標(biāo)記的親和素,形成"抗體-抗原-酶標(biāo)抗體"復(fù)合物。
?顯色?:加入TMB底物,被HRP催化后由藍(lán)色變?yōu)辄S色。
?測定?:用酶標(biāo)儀在450nm波長測定吸光度(OD值),濃度與OD值成正比。
樣本要求:

1. 樣本類型與處理
?血清?:使用無熱原/內(nèi)毒素試管采集,避免溶血或脂血。1000×g離心10分鐘分離血清,-20℃保存,避免反復(fù)凍融。
?血漿?:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝,離心后取上清。
?細(xì)胞上清?:1000×g離心10分鐘去除顆粒,-70℃保存。
?組織勻漿?:生理鹽水勻漿后離心取上清,-20℃保存。
2. 注意事項(xiàng)
樣本中禁止添加NaN3,以免抑制HRP活性。
細(xì)胞培養(yǎng)上清可能因細(xì)胞狀態(tài)等因素導(dǎo)致檢測波動(dòng),建議設(shè)復(fù)孔。
操作步驟:

試劑準(zhǔn)備將試劑盒平衡至室溫(20-25℃),濃縮洗滌液按 1:20 稀釋備用。標(biāo)準(zhǔn)品按說明書進(jìn)行梯度稀釋,配制系列濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液。
實(shí)驗(yàn)流程加樣:設(shè)置空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔,空白孔僅加稀釋液,其余孔分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品,37℃孵育。加酶標(biāo)抗體:除空白孔外,每孔加入酶標(biāo)抗體,輕輕混勻,37℃避光孵育。洗滌:棄去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后甩干,重復(fù)洗滌 4-5 次,最后拍干殘留液體。顯色:每孔加入 TMB 顯色液,37℃避光孵育,孔內(nèi)呈現(xiàn)藍(lán)色。終止:每孔加入終止液,混勻后顏色由藍(lán)色轉(zhuǎn)為黃色。檢測:在 450nm 波長下測定各孔 OD 值,15 分鐘內(nèi)完成讀數(shù)。
關(guān)鍵提示實(shí)驗(yàn)全程嚴(yán)格控溫,孵育時(shí)使用封板膜避免蒸發(fā)。洗滌需充分,否則易造成高背景、結(jié)果偏差。顯色液需避光,終止順序與加樣順序保持一致,確保充分混勻。
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