產品簡介:

本試劑盒采用競爭法酶聯免疫吸附法(ELISA),專用于定量檢測小鼠血清、血漿、尿液中的垂草扁桃酸(VMA)含量。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL,靈敏度達 0.16 ng/mL,適用于兒茶酚胺代謝、嗜鉻細胞瘤及腎上腺髓質功能研究等領域。
產品名稱:小鼠垂草扁桃酸(VMA)elisa試劑盒
英文名稱:VMA ELISA Kit
產品規格:48T/96T
產品貨號:CS-1182E
檢測原理:

小鼠垂草扁桃酸 (VMA) elisa 試劑盒的原理是競爭法,通過固相載體包被抗原與樣本抗原競爭結合抗體,再用酶標抗體識別,最后通過底物顯色反應來定量檢測。
固相化:微孔板預先包被 VMA 人工抗原。
結合:加入標準品或樣本,樣本 VMA 與固相 VMA 競爭結合抗體。
檢測:加入酶標特異性抗體,形成抗原抗體復合物。
顯色:加入 TMB 底物,被 HRP 催化后由藍色變為黃色。
測定:用酶標儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值),濃度與 OD 值成反比。
實驗步驟?:

?試劑準備?:將試劑盒平衡至室溫(20-25℃),洗滌緩沖液按1:19稀釋。標準品梯度稀釋至所需濃度。
?加樣?:每孔加入100μL標準品或樣本,37℃孵育90分鐘。
?洗滌?:棄去液體,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后甩干,重復5次。
?加檢測抗體?:每孔加入100μL檢測抗體-HRP,37℃孵育60分鐘。
?洗滌?:同步驟3。
?顯色?:每孔加入90μL TMB底物A+B混合液,37℃避光孵育15分鐘。
?終止?:每孔加入50μL終止液,立即搖勻(顏色由藍變黃)。
?檢測?:450nm波長測定吸光度(OD值),15分鐘內完成。
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操作步驟?:

?1、試劑與樣本準備?:
將試劑盒平衡至室溫(20-25℃),按說明書稀釋洗滌緩沖液(通常1:19)。
?標準品?:用梯度稀釋至0.313、0.625、1.25、2.5、5、10、20 ng/mL系列濃度。
?樣本?:血清、血漿或組織勻漿上清。若t-PA濃度高,可按說明書(如1:10)稀釋。
?2、加樣與孵育?:
每孔加入100μL標準品或樣本。
輕輕振蕩混勻,避免觸碰孔壁。
37℃孵育90分鐘(部分試劑盒可能為120分鐘,需以說明書為準)。
?3、洗滌?:
棄去孔內液體,用洗滌緩沖液加滿每孔,靜置30秒后甩干,重復5-6次。
4?、加檢測抗體與孵育?:
每孔加入100μL化抗豬t-PA檢測抗體。
37℃孵育60分鐘。
5?、再次洗滌?:
同步驟3,洗去未結合抗體。
6?、顯色?:
每孔加入90-100μL TMB底物混合液(A液+B液)。
37℃避光孵育10-15分鐘。
?7、終止與測定?:
每孔加入50μL終止液,立即混勻(顏色由藍變黃)。
在加終止液后15分鐘內,用酶標儀在450nm波長處測定各孔吸光度(OD值)。