產品簡介:

本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法(ELISA),專用于定量檢測小鼠血清、血漿、組織勻漿及細胞上清液中的凋亡相關因子配體(FASL)蛋白濃度。檢測范圍覆蓋0.313-20 ng/mL,靈敏度達0.16 ng/mL,適用于細胞凋亡調控、免疫耐受、炎癥反應及腫瘤免疫相關研究等領域。
產品名稱:小鼠凋亡相關因子配體(FASL)elisa試劑盒
英文名稱:FASL ELISA Kit
產品規格:48T/96T
產品貨號:CS-1146E
檢測原理:

小鼠凋亡相關因子配體(FASL) elisa試劑盒的原理是雙抗體夾心法,通過固相載體捕獲抗原,再用酶標記的檢測抗體進行識別,最后通過底物顯色反應來定量檢測。
固相化:微孔板預先包被抗小鼠FASL抗體。
結合:加入標準品或樣本,FASL被固相抗體捕獲。
檢測:加入生物su化的抗小鼠FASL抗體和HRP標記的親和素,形成"抗體-抗原-酶標抗體"復合物。
顯色:加入TMB底物,被HRP催化后由藍色變為黃色。
測定:用酶標儀在450nm波長測定吸光度(OD值),濃度與OD值成正比。
實驗步驟?:

?試劑準備?:將試劑盒平衡至室溫(20-25℃),洗滌緩沖液按1:19稀釋。標準品梯度稀釋至所需濃度。
?加樣?:每孔加入100μL標準品或樣本,37℃孵育90分鐘。
?洗滌?:棄去液體,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后甩干,重復5次。
?加檢測抗體?:每孔加入100μL檢測抗體-HRP,37℃孵育60分鐘。
?洗滌?:同步驟3。
?顯色?:每孔加入90μL TMB底物A+B混合液,37℃避光孵育15分鐘。
?終止?:每孔加入50μL終止液,立即搖勻(顏色由藍變黃)。
?檢測?:450nm波長測定吸光度(OD值),15分鐘內完成。
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操作步驟?:

1.試劑平衡試劑盒室溫平衡 30 min;濃縮洗滌液按說明書稀釋混勻。
2.設孔加樣設空白、標準品、待測樣品孔,精準加樣,封板。
3.溫育結合37℃孵育 30–60 min,棄液拍干。
4.洗板加滿洗滌液浸泡,甩干拍干,重復3–5 次。
5.加酶結合物除空白孔外每孔加 HRP 標記液,封板 37℃孵育。
6.再次洗板充分洗凈未結合游離酶,控干殘留液體。
7.顯色避光加顯色液 A/B,避光 37℃顯色 10–15 min。
8.終止讀數加終止液變色穩定后,立刻酶標儀讀 OD 值。
9.結果計算標準曲線擬合,