本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA),專用于定量檢測小鼠血清、血漿及相關(guān)樣本中的破傷風抗體或抗原濃度。檢測范圍覆蓋0.313-20 ng/mL,靈敏度達0.16 ng/mL,適用于破傷風免疫監(jiān)測、感染診斷及疫苗效果評估等領(lǐng)域。
產(chǎn)品名稱 |
小鼠破傷風(Tetanus)elisa試劑盒 | 英文名稱 | Tetanus ELISA Kit |
貨號 | CS-0835E | 規(guī)格 | 48T/96T |
保存 | 避光保存 | 用途 | 僅供科研實驗 |
核心原理:

?固相化?:微孔板預(yù)先包被抗小鼠破傷風抗體或破傷風抗原。
?結(jié)合?:加入標準品或樣本,破傷風抗原或抗體被固相抗體或抗原捕獲。
?檢測?:加入化的對應(yīng)抗體和HRP標記的親和素,形成"抗體-抗原-酶標抗體"復(fù)合物。
?顯色?:加入TMB底物,被HRP催化后由藍色變?yōu)辄S色。
?測定?:用酶標儀在450nm波長測定吸光度(OD值),濃度與OD值成正比。
樣本要求:

1. 樣本類型與處理
?血清?:使用無熱原/內(nèi)毒素試管采集,避免溶血或脂血。1000×g離心10分鐘分離血清,-20℃保存,避免反復(fù)凍融。
?血漿?:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝,離心后取上清。
?細胞上清?:1000×g離心10分鐘去除顆粒,-70℃保存。
?組織勻漿?:生理鹽水勻漿后離心取上清,-20℃保存。
2. 注意事項
樣本中禁止添加NaN3,以免抑制HRP活性。
細胞培養(yǎng)上清可能因細胞狀態(tài)等因素導(dǎo)致檢測波動,建議設(shè)復(fù)孔。
操作步驟:

1. 試劑準備
將試劑盒平衡至室溫(20-25℃),洗滌緩沖液按1:19稀釋。?
標準品梯度稀釋:取6管標準品,按說明書稀釋至0.156-10 ng/mL。
2. 實驗流程
?加樣?:每孔加入100μL標準品或樣本,37℃孵育90分鐘。
?洗滌?:棄去液體,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后甩干,重復(fù)5次。
?加檢測抗體?:每孔加入100μL檢測抗體-HRP,37℃孵育60分鐘。
?洗滌?:
?顯色?:每孔加入90μL TMB底物A+B混合液,37℃避光孵育15分鐘。
?終止?:每孔加入50μL終止液,立即搖勻(顏色由藍變黃)。?
?檢測?:450nm波長測定吸光度(OD值),15分鐘內(nèi)完成。
關(guān)鍵提示
顯色底物避光保存,混合后應(yīng)為無色。
終止液加入順序需與顯色一致,充分混勻避免綠色殘留。
使用封板膜防止蒸發(fā),確保孵育溫度穩(wěn)定。
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